Lényegében mi az élesztő két-hibrid rendszer főbb lényege a fehérje-fehérje kölcsönhatásoknál?

[link]

Arra való, hogy találjanak olyan fehérjét, amely egy adott fehérjéhez kötődik.

Élesztő sejtekbe transzformálnak két plazmidot. Plazmid1 tartalmazza a már ismert fehérjét, amely egy DNA-kötő fehérjével fuzionálva van. Plazmid2 olyan fúziós fehérjét tartalmaz, aminek az egyik fele az ismeretlen fehérje (egy cDNS könyvtárból), a másik fele pedig egy ún. transzaktiváló domén, amely egy bizonyos gént aktivál, ha a DNS közelébe kerül. Ez a gén a riporter gén, pl. lacZ, His, ami alapján screeninget lehet csinálni. Tehát, ha az ismeretlen fehérje kötődik az ismert fehérjénez, akkor aktiválódik a riporter gén. Ezekből az élesztőkből ki lehet vonni a plazmidot, szekvenálni, és megtudni, hogy melyik fehérjék között lép fel kölcsönhatás.